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    Bioz 嗜中性粒細胞

    發(fā)布時間: 2022-12-02  點擊次數(shù): 1071次

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    Bioz 嗜中性粒細胞

    CD177P1假基因轉(zhuǎn)化對人嗜中性粒細胞 CD177表達異質(zhì)性的影響左彭武1,2,榮亮3,Thomas Ohnesorg4Vicky Cho5,Wesley Lam1,Walter P。Abhayaratna2,Paul A. Gatenby6,Chandima Perera 7,Yafei Zhang 3,Belinda Whittle3,Andrew Sinclair4,Christopher C. Goodnow5,Matthew Field5,T. Daniel Andrews5,Matthew C.庫克1,5,6 * 1轉(zhuǎn)化研究單位,堪培拉醫(yī)院,Woden,澳大利亞首都領(lǐng)地,澳大利亞,2臨床試驗單位,堪培拉醫(yī)院,Woden,澳大利亞首都領(lǐng)地,澳大利亞,3澳大利亞物種學(xué)設(shè)施,澳大利亞國立大學(xué),澳大利亞首都領(lǐng)地,澳大利亞,4默多克兒童研究所,墨爾本大學(xué),兒童醫(yī)院,墨爾本,維多利亞,澳大利亞,5免疫學(xué)系,約翰 · 科廷醫(yī)學(xué)研究學(xué)院,澳大利亞國立大學(xué),阿克頓,澳大利亞首都地區(qū),澳大利亞首都地區(qū),Woden,澳大利亞首都地區(qū),堪培拉醫(yī)院免疫學(xué)系,澳大利亞首都地區(qū),Woden,澳大利亞首都地區(qū),堪培拉醫(yī)院,風(fēng)濕病學(xué)系大多數(shù)人同時具有 CD177neg  CD177pos 嗜中性粒細胞,但1-10% 的人是 CD177null,使他們處于形成抗嗜中性粒細胞抗體的風(fēng)險中,這可能導(dǎo)致輸血相關(guān)的急性肺損傷和新生兒同種免疫性中性粒細胞減少癥。通過對 CD177基因座進行深度測序,我們編目了 CD177單核苷酸變體,并在 CD177無效個體中鑒定了由外顯子7中的單個堿基替換產(chǎn)生的新的終止密碼子。這不是 CD177本身的突變,而是當(dāng) CD177的外顯子7全由 CD177假基因(CD177P1)提供時產(chǎn)生的 CD177null 表型,這似乎是由等位基因轉(zhuǎn)化引起的。在表達 CD177的個體中,CD177基因座同時含有 CD177P1 CD177序列。CD177hi 中性粒細胞在血液中的比例是一個遺傳性狀。CD177hi 嗜中性粒細胞的豐度與 CD177參考等位基因的純合性相關(guān),而異位 CD177P1基因轉(zhuǎn)換的雜合性與增加的 CD177neg 嗜中性粒細胞相關(guān),其中 CD177P1部分摻入等位基因和配對完整的 CD177等位基因被轉(zhuǎn)錄。CD177表達的人類中性粒細胞異質(zhì)性是由異位等位基因轉(zhuǎn)換引起的。解決 CD177無效表型的遺傳基礎(chǔ)確定了一種篩選有 CD177同種免疫風(fēng)險的個體的方法。中性粒細胞特異性抗原 CD177的表達在人群中有所不同。1-10% 的人類 CD177null。CD177缺失母親所生的 CD177pos 新生兒易患同種免疫性中性粒細胞減少癥。有趣的是,CD177pos  CD177neg 人群嗜中性粒細胞經(jīng)常同時存在于個體內(nèi)。異質(zhì)性 CD177表達的原因尚不清楚。我們對具有不同水平 CD177表達的個體中的 CD177基因座進行了深度測序,編目了 CD177單核苷酸變體,并鑒定了導(dǎo)致缺乏 CD177表達的過早終止密碼子。來自嗜中性粒細胞的信使 RNA 與基因組 CD177 DNA 的比較鑒定了與 CD177P1假基因的顯著序列相似性,這可能解釋了公共數(shù)據(jù)庫中存在的錯誤注釋,但也解釋了交叉錯誤的易感性。事實上,我們報道,當(dāng) CD177基因的外顯子7全由 CD177P1通過基因轉(zhuǎn)換提供時,負責(zé) CD177無效表型的終止密碼子就出現(xiàn)了。我們還表明,個體內(nèi) CD177hi 中性粒細胞數(shù)量的比例是一個可遺傳性狀,由完整的 CD177和轉(zhuǎn)化的 CD177等位基因的比例決定。此外,在個體內(nèi),CD177基因在 CD177neg  CD177hi 嗜中性粒細胞中有差異轉(zhuǎn)錄。我們的工作解決了 CD177表型的遺傳基礎(chǔ),并確定了一種篩選 CD177同種免疫風(fēng)險個體的方法。引言 CD177(也稱為嗜中性粒細胞特異性抗原 B1[ NB1] ,人嗜中性粒細胞抗原2a [ HNA-2a ]和紅細胞增多癥1[ PRV1])是屬于 Ly-6家族的56-64kDa 蛋白[1,2] ,并且僅通過糖基磷脂酰肌醇(GPI)-連接在嗜中性粒細胞上表達[3,4]CD177的表達在人群中是異質(zhì)的。1-10% 的人是 CD177無效的,而其余的人攜帶嗜中性粒細胞,這些嗜中性粒細胞是 CD177表達的雙模式或三模式[4-6]。人群中嗜中性粒細胞表面抗原表達的異質(zhì)性導(dǎo)致由于獲得性免疫耐受喪失而不易形成同種抗體。經(jīng)胎盤傳代或輸注嗜中性粒細胞抗體與嚴(yán)重的新生兒同種免疫性中性粒細胞減少癥(NAN)[7]和輸血相關(guān)急性肺損傷(TRALI)[8,9]有關(guān)。多態(tài)性人嗜中性粒細胞抗原(HNA)包括 CD16 FcγRIIIb ( FCGR3B 編碼的 HNA-1a,-1b,-1c  -1d)[10] ,CD177( CD177編碼的 HNA-2a)[11,12] ,堿轉(zhuǎn)運蛋白樣蛋白2(HNA-3a)[13-15] ,CD11b (HNA-4a) CD11a (HNA-5a)[16-19]。在某些情況下,解釋同種異體抗原性的遺傳多態(tài)性已經(jīng)得到解決。例如,FCGR3B (命名為 HNA-1a,-1b  -1c)的三個單獨的等位基因似乎解釋了 CD16同種異體抗原性,并且每種定義異型的不同表位通過五種氨基酸交換的變化來定[10,20-22]。同樣,單氨基酸取代解釋了 HNA-3a 的抗原性[13,14,23]。缺乏 HNA-1a,-1b,-1c-1d,HNA-3aHNA-4a  HNA-5a 與母源抗體的形成有關(guān)[24,25]。CD177缺乏也已被證明導(dǎo)致產(chǎn)婦同種異體抗體的發(fā)展,引起新生兒同種異體免疫性中性粒細胞減少[11]。此外,CD177與系統(tǒng)性血管炎有關(guān),因為主要自身抗原之一蛋白酶3是原代顆粒的組成部分,但與 CD177相關(guān)聯(lián)暴露于嗜中性粒細胞表面[26,27]。全闡明嗜中性粒細胞同種異體抗原變異的遺傳基礎(chǔ)是一個重要的目標(biāo),因為在目前的臨床實踐中,嗜中性粒細胞抗體的檢測在技術(shù)上是具有挑戰(zhàn)性和有限的[28]。相比之下,鑒定抗原表達的遺傳基礎(chǔ),特別是在缺乏抗原的情況下,允許篩查在這些疾病環(huán)境中有產(chǎn)生特異性抗體風(fēng)險的個體[29]CD177表達的變異一直是以前研究的主題(S1)。從兩個 CD177null 供體的嗜中性粒細胞擴增的 mRNA 分析顯示了 CD177PLOS 遺傳學(xué)的兩個單獨的遺傳規(guī)范 | DOI: 10.1371/journal.pgen。100606720165262/22競爭利益作者已經(jīng)宣布沒有競爭利益存在。 RNA 插入。在一個病例中,有一個內(nèi)含子片段插入到外顯子6中,而在另一個病例中,有一個外顯子4的另一個5’端剪接供體。兩者都被假定通過引入框內(nèi)提前終止密碼子引起 CD177表達的喪失[30,31](S1)。進一步的研究揭示了某些 CD177單核苷酸變異(SNV)與不同 CD177表型之間的關(guān)聯(lián),盡管解釋這些效應(yīng)的機制尚未闡明,并且關(guān)聯(lián)不足以允許診斷測試[32,33]。最近,在 CD177中鑒定了引入終止密碼子的 cDNA829A > T 突變的 SNV 作為 CD177表達喪失的原因[34]。我們開始通過對 CD177基因座上嗜中性粒細胞衍生的基因組 DNA 進行深度測序來確定個體間和個體內(nèi) CD177表型的遺傳基礎(chǔ)。采用這種方法,我們證實了 Li 等人在 CD177無效個體中鑒定的終止密碼子,但是發(fā)現(xiàn)當(dāng) CD177基因的外顯子7通過與 CD177假基因(CD177P1)的等位基因轉(zhuǎn)換提供時發(fā)生變異,其包含負鏈上的 CD177外顯子4-9的序列同源物。這種變異存在于種系中,而不是在嗜中性粒細胞中體細胞獲得的。CD177純合的個體具有更高的 CD177表達,而異位 CD177P1外顯子7轉(zhuǎn)換的個體在血液中具有更大比例的 CD177neg 嗜中性粒細胞。我們證明 CD177是由 CD177/CD177P1等位基因的比例確定的遺傳性狀,并且在同一個體內(nèi)的 CD177neg  CD177hi 嗜中性粒細胞中發(fā)現(xiàn)了 CD177轉(zhuǎn)錄。這些發(fā)現(xiàn)解決了個體間(CD177null  CD177表達)和個體內(nèi)(CD177neg  CD177hi 亞群) CD177表達的基礎(chǔ),并確定了篩選有 CD177同種免疫風(fēng)險的個體的方法。

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